Суміш реагентів  PCR MIX 2х-R застосовується для PCR ампліфікації ДНК і розрахована на проведення 100 реакцій в об’ємі  20 мкл реакційної суміші. Суміш реагентів  PCR MIX 2х-R   має в своєму складі готову для ампліфікації ДНК, інгібовану  Taq ДНК полімеразу, дезоксинуклеозидтрифосфати та хлорид магнію, фарбу для нанесення на гель в складі оптимізованої буферної системи для проведення стандартної PCR.

Призначення

Суміш реагентів  PCR MIX 2х-R застосовується для PCR ампліфікації ДНК і розрахована на проведення 100 реакцій в об’ємі  20 мкл реакційної суміші. Може використовуватись в науково-дослідній лабораторії молекулярної біології і генетики, ДНК-діагностиці, тощо.

Суміш реагентів  PCR MIX 2х-R   має в своєму складі готову для ампліфікації ДНК, інгібовану  Taq ДНК полімеразу, дезоксинуклеозидтрифосфати та хлорид магнію, фарбу для нанесення на гель в складі оптимізованої буферної системи для проведення стандартної PCR.

Склад набору

1. 2х суміш для ПЛР – пробірка з сумішшю синього кольору і червоною кришкою   1050 мКл (зберігати при -20⁰С).
2. Вода деіонізована для PCR - 1 пробірка, 1,0 мл з кришкою блакитного кольору (зберігати при -20⁰С).

Протокол  проведення  PCR

1. Перед проведенням реакції приготувати потрібну кількість пробірок для ПЛР.
2. Промаркувати пробірки згідно протоколу досліду, (+), (-) контролі та зразки для дослідження.
3. Додати у всі пробірки по 3-5 мкл суміші праймерів. Рекомендована кінцева концентрація праймерів 0.1-0.5 мкМ.
4. Додати у всі пробірки, враховуючі контролі, по 10 мкл 2х суміші для ПЛР.
5. Додати у відповідні пробірки по 1-5 мкл  (20-200 нг)  ДНК зразків, що досліджуються і  (+) контроль. В якості (-) контроля можливо використати деіонізовану  воду або той буфер, в якому  розчиняли  ДНК зразків. Загальний об’єм реакційної суміші - 20 мкл. Додати у всі пробірки по 1 каплі (не менше 20 мкл)  оливи для ПЛР.

      Увага!  Для запобігання контаминації  рекомендовано використовувати спеціальні наконечники с анти-аерозольними фільтрами.

6. Перенести пробірки в термоблок ампліфікатора і розпочати відповідну програму ампліфікації.

     Для активації інгібованої полімерази  потрібно обов’язково програмувати цикл попередньої денатурації на +95ºС  5 хвилин!!

7. Після завершення ампліфікації всі пробірки перенести в кімнату для проведенyя електрофорезу (детекції) ДНК. Для аналізу достаньо нанести в лунки гелю 5-10 мкл ПЛР-продукту без додавання  фарби для нанесення.

Написати відгук

Ваше Ім’я:

Рейтинг

Добре
entry_bads
Ваш відгук:
Добавить фото

Ссылка на фото:

Введіть код, вказаний на зображенні:

Продовжити