Набір реагентів  PCR MIX 2х HOT застосовується для PCR ампліфікації ДНК  і розрахований на проведення 100 реакцій в об’ємі  20 мкл реакційної суміші. Набір реагентів PCR MIX 2х HOT   має в своєму складі суміш, готову для ампліфікації ДНК, інгібовану для "гарячого старту" Taq ДНК полімеразу, дезоксинуклеозидтрифосфати, хлорид магнію та фарбу для нанесення на гель в складі оптимізованої буферної системи для проведення стандартної PCR).

Призначення

    Набір реагентів  PCR MIX 2х HOT застосовується для PCR ампліфікації ДНК  і розрахований на проведення 100 реакцій в об’ємі  20 мкл реакційної суміші. Набір реагентів може використовуватись в науково-дослідній лабораторії молекулярної біології і генетики, ДНК-діагностиці, тощо.

    Набір реагентів PCR MIX 2х HOT   має в своєму складі суміш, готову для ампліфікації ДНК, інгібовану для "гарячого старту" Taq ДНК полімеразу, дезоксинуклеозидтрифосфати, хлорид магнію та фарбу для нанесення на гель в складі оптимізованої буферної системи для проведення стандартної PCR).

Склад набору

1. 2х суміш для ПЛР - 1 пробірка з розчином блакитного кольору  по 1050 мКл, червона кришка (зберігати при -20⁰С)
2. Вода деіонізована для PCR - 1 пробірка, 1,0 мл, блакитна кришка (зберігати при -20⁰С)

Протокол  проведення  PCR

1. Перед проведенням реакції приготувати потрібну кількість пробірок для ПЛР.
2. Промаркувати пробірки згідно протоколу досліду, (+), (-) контролі та зразки для дослідження.
3. Додати у всі пробірки, враховуючі контролі, по 10 мкл 2х суміші для ПЛР.
4. Додати у всі пробірки по 0,1-0,5 мкл суміші праймерів. Рекомендована кінцева концентрація праймерів 0.1-0.5 мкМ.
5. Додати у відповідні пробірки по 1-9 мкл  (20-200 нг)  ДНК зразків, що досліджуються і  (+) контроль. В якості (-) контроля можливо використати деіонізовану  воду або той буфер, в якому  розчиняли  ДНК зразків. Довести водою об’єм реакційної суміші до 20 мкл. Додати у всі пробірки по 1 краплі (не менше 15 мкл)  оливи для ПЛР. При використанні ампліфікаторів з підігріваємою кришкою використання оливи не обов’язкове.

      Увага!  Для запобігання контаминації  рекомендовано використовувати спеціальні наконечники с анти-аерозольними фільтрами.

6. Перенести пробірки в термоблок ампліфікатора і розпочати відповідну програму ампліфікації. Для активації полімерази «гарячого старту» потрібно обов’язково програмувати цикл попередньої денатурації на +95ºС не менше 10 хвилин !!!
7. Після завершення ампліфікації всі пробірки перенести в кімнату для проведення електрофорезу (детекції) ДНК. Для аналізу достатньо нанести в лунки гелю 5-10 мкл ПЛР-продукту без додавання  фарби для нанесення.

Написати відгук

Ваше Ім’я:

Рейтинг

Добре
entry_bads
Ваш відгук:
Добавить фото

Ссылка на фото:

Введіть код, вказаний на зображенні:

Продовжити